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骨保護(hù)素試劑盒正確的操作流程應(yīng)該是這樣的！
2020-03-24 瀏覽次數(shù)：2157
骨保護(hù)素試劑盒預(yù)期用途：用于定量測定人血清或血漿中骨保護(hù)素的含量，骨保護(hù)素（OPG）或破骨細(xì)胞抑制因子（OCIF），是腫瘤壞死因子受體超家族11b（基因名TNFRSF11B）的一種糖蛋白。OPG由380個(gè)氨基酸合成，并在細(xì)胞內(nèi)組裝成同型二聚體，之后大部分以二硫鍵連接的同型二聚體分泌到細(xì)胞外間隙中。骨保護(hù)素由許多不同的組織和細(xì)胞類型（包括成骨細(xì)胞）產(chǎn)生的。 OPG作為RANKL的誘餌受體，是骨吸收的負(fù)調(diào)節(jié)因子，能抵消其促進(jìn)破骨細(xì)胞生產(chǎn)的功能。這種糖蛋白也參與血管鈣化的調(diào)控。
骨保護(hù)素試劑盒用于科研請貯存于2-8℃，切勿冷凍，避免陽光直曬。未使用完的酶標(biāo)板條應(yīng)密封，2-8℃保存，具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn)，因其性質(zhì)穩(wěn)定、使用方便、價(jià)格低廉、在科研領(lǐng)域用途比較廣泛
骨保護(hù)素試劑盒的操作流程：
1. 骨保護(hù)素試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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